Validación del método de plataforma simple para el seguimiento de linfocitos T CD4+ por citometría de flujo en el contexto de infección por VIH, Caracas, Venezuela

Abstract

La citometría de flujo es un método altamente preciso para determinar el recuento absoluto de linfocitos T CD4+ en personas infectadas por el virus de inmunodeficiencia humana (VIH). Este recuentoes esencial para evaluar el estado inmunológico,estratificar riesgos y determinar la necesidad de intervenciones profilácticas frente a infecciones oportunistas. En el presente estudio se validó la utilidad de la tecnología de plataforma simple (PTS) en comparación con la estrategia convencional de plataforma doble (PTD), empleando un protocolo volumétrico con anticuerpos monoclonales anti-CD3, anti-CD4, anti-CD8 y anti-CD45. Se analizaron 103 muestras de pacientes procedentes del Instituto de Inmunología “Dr. Nicolás Bianco”, sometidas previamente a un hemograma completo (equipo Mindray BC30) y posteriormente a marcaje in vitro para ser evaluadas en el citómetro de flujo Novocyte Advanteon (Agilent®). Se determinaron las correlaciones y la concordancia entre ambos métodos mediante gráficos de Bland-Altman, hallándose que los recuentos de leucocitos totales fueron comparables(6 374 ± 2 405 células/mm³ en PTD vs. 6.283 ± 2.292 células/mm³ en PTS) con una alta correlación (R² = 0,99) y un sesgo de 18,8. Con estos resultados se concluye que la tecnología de plataforma simple constituye una alternativa confiable, con menor variabilidad y mayor facilidad operativa, lo que la hace especialmente valiosa en contextos de recursos limitados. SUMMARY: Flow cytometry is a highly precise method for determining the absolute count of CD4+ T lymphocytes in HIV-infected individuals. This parameter is essential for immunological evaluation, risk stratification, and prophylactic management of opportunistic infections. This study validates the usefulness of single-platform technology (PTS) compared with the standard dualplatform (PTD) approach, using a volumetric protocol with anti-CD3, anti-CD4, anti-CD8, and anti-CD45 monoclonal antibodies. A total of 103 patient samples from the Instituto de Inmunología “Dr. Nicolás Bianco” were processed, with a complete blood count performed on the Mindray BC30 and an in vitro surface marker labeling followed by evaluation on the Novocyte Advanteon flow cytometer (Agilent®). Correlation and agreement between both methods with Bland-Altman analysis, showed comparable total leukocyte counts (6,374 ± 2,405 cells/mm³ in PTD vs. 6,283 ± 2,292 cells/mm³ in PTS) with a high correlation (R² = 0.99) and a bias of 18.8. Therefore, the single-platform method is a reliable alternative with lower variability and operational simplicity, making it especially advantageous in resource-limited settings.