Diagnóstico serológico diferencial de la fase aguda y crónica de la Esquistosomiasis: estudio de las glicoproteínas del glicocalix de la cercaria

Abstract

La Esquistosomiasis o Bilharziosis es una de las enfermedades parasitarias más difundida en el mundo que afecta a más de 200 millones de personas en las zonas tropicales e intertropicales. Es causada por algunas de las especies de gusanos planos del género Schistosoma y consiste en una dolencia fundamentalmente crónica, que debilita severamente a quienes la padecen, reduce su capacidad productiva, los incapacita y limita sus perspectivas de progreso económico y social. Después de la malaria, esta parasitosis ocupa el segundo lugar en importancia desde un punto de vista socioeconómico y de salud pública. En Venezuela, la única especie que infecta al hombre es Schistosoma mansoni el cual se encuentra diseminado en una superficie de 15.000 Km2 de la zona centro-costera del país (estados Aragua, Carabobo, el norte de Guárico, Miranda y Vargas). Las cercarias del Schistosoma mansoni son estadios larvales constituidos por un cuerpo y una cola bifurcada, los cuales están recubiertos por un tegumento con un área de 20.000 μm2. En su parte más externa, el tegumento está cubierto por una membrana trilaminada limitada por un denso glicocalix altamente antigénico que parece jugar un papel importante en la respuesta innata y adaptativa del hospedador y es el responsable de la reacción antígeno-anticuerpo que ocurre en presencia de sueros de pacientes. Una serie de métodos parasitológicos, bioquímicos e inmunoquímicos fueron utilizados para llevar a cabo este estudio. Su aplicación permitió investigar desde la cercario-reacción más sencilla hasta lo más complejo como la identificación, aislamiento y caracterización de los polipéptidos antigénicos y sus epítopes en el glicocalix de la cercaria. Un método mecánico sencillo fue diseñado para separar las cercarias en cuerpos y colas sin producir pérdida del glicocalix y sin afectar su morfología externa, ni su antigenicidad. La cercario-reacción fue de utilidad para monitorear la presencia del glicocalix durante la separación de cercarias en cuerpos y colas. Nuevos antígenos aparecieron en ambas regiones como consecuencia de la separación. Los antígenos identificados en una u otra región como consecuencia de la separación (58,2 y 64 kDa en cuerpos y 35 y 53,6 kDa en cuerpos y colas). Los antígenos identificados en los extractos de cuerpos y de colas no resultaron ser la suma de los identificados en el extracto de cercarias completas. Antígenos de peso molecular entre 16,5-84,3 kDa fueron reconocidos durante las primeras seis semanas de infección (fase aguda) y a las 16 semanas (fase crónica), antígenos adicionales de alto peso molecular fueron detectados (104-109,8 kDa). Esto podría ser consecuencia de eventos inmunitarios producidos durante el progreso de la fase crónica de la infección. La oxidación-reducción con metaperiodato de sodio/borohidrato de sodio de la glicoproteína antigénica dominante de 65 kDa, no alteró su reconocimiento por el suero de infección aguda y crónica, mientras que las de 97,5-100 y 108,2 kDa fueron reconocidas antes y después del tratamiento únicamente por el suero de infección crónica. Esto sugiere que los anticuerpos producidos durante la infección crónica están dirigidos contra epítopes glicosídicos y peptídicos de estas glicoproteínas, lo que puede explicar la reducción en intensidad de las bandas del doblete de 97,5-100 kDa reconocidas por el suero de infección crónica después del tratamiento. El hecho de que en la infección aguda se produzcan anticuerpos que reconocen epítopes polipeptídicos en la glicoproteína de 65 kDa y en la fase crónica contra otros tres (97,5-100 y 108,2 kDa), podría ser útil para la identificación de su secuencia polipeptídica conducente a la síntesis química de epítopes lineales destinados a la discriminación de estas dos fases de la enfermedad. La evaluación de reactividad cruzada con otros parásitos relacionados es requerida para determinar la especificidad de estos epítopes de antígenos glicoprotéicos.